• Document: El Biorreactor de Imersión Temporal (BIT ) en la Micropropagación de plantas y su aplicación a las ornamentales.
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“El Biorreactor de Imersión Temporal (BIT®) en la Micropropagación de plantas y su aplicación a las ornamentales”. Dra. Maritza M. Escalona Morgado Laboratory for Plant Cell and Tissue Culture Centro de Bioplantas Universidad de Ciego de Ávila, Cuba Limitaciones de la micropropagación de plantas • Requiere gran número de envases pequeños. • Transferencia periódica del material vegetal. • Generalmente se emplea medio semi-sólido lo cual dificulta la semi-automatización. • La manipulación (selección, corte y trasplante) representa 40-60% de los costos de producción (Chu, 1995). • Aunque la manipulación es la principal parte del trabajo y la más técnica, la limpieza, llenado y manipulación de un gran número de envases es engorrosa (Maene y Debergh, 1985) • Pérdidas durante la aclimatización (Reuther, 1985). LA APLICACIÓN LAS TÉCNICAS DE LA COMERCIAL DE LA MICROPROPAGACIÓN MICROPROPAGACIÓN CONVENCIONAL ESTA LIMITADA A NO SON SIEMPRE CULTIVOS CON ALTO ESCALABLES VALOR AÑADIDO Para su aplicación comercial se necesita disponer de nuevas tecnologías para la semi- automatización y mejorar los protocolos de aclimatización (Kitto, 1997). Ventajas del medio líquido para la micropropagación de plantas. • Reduce los costos de producción y permite la semi-automatización del proceso. • Mayor facilidad de toma de los nutrientes por los explantes ya que se evita la difusión a través del agar • Suministra condiciones de cultivo más uniformes. • El medio puede ser fácilmente renovado sin cambio de envase. • Se reduce el tiempo de transferencia. HIPERHIDRICIDAD: Principal desventaja del medio líquido. ¿CÓMO CONTROLARLA ? • Empleo de soportes (puentes de papel, bloques de celulosa o esponjas (Etienne et al., 1991; Smith y Spomer, 1995; Wataad et al., 1997). • Raft para soportar los explantes sobre un medio líquido estacionario (Connor y Meredith, 1984; Hamilton et al., 1985). • Adición de medio líquido a cultivos establecidos en agar (doble capa) (Maene y Debergh 1985). • El empleo de biorreactores de niebla (Weathers y Giles, 1988). • El uso de medio de cultivo con bajas concentraciones de sales y sacarosa e incremento de la luz (Takayama y Akita, 2005). • El Cultivo en Inmersión Temporal (Teisson et al., 1995). Sistemas de Inmersión Temporal: contacto parcial o total entre los explantes y el medio de cultivo líquido. Inmersión completa y renovación del medio líquido Inmersión completa con transferencia neumática del medio de cultivo sin renovación del medio líquido Inmersión parcial y renovación del medio líquido RITA® BIT® Etienne & Berthouly, 2002, Plant Cell Tiss. Org. Cult. OPERACIONES DEL BIT® (Twin Flasks System): 1 3 2 Air pump Regulator valve Solenoid valve Hydrophobic air filter  1- Dos frascos de cultivo conectados entre sí, uno para los explantes y otro para el medio de cultivo.  2. Inicio de la inmersión, el medio de cultivo es impulsado por el aire del compresor al frasco que contiene los explantes.  3. Fin de la inmersión, la segunda válvula solenoide se abre y el medio de cultivo regresa al frasco que lo contiene. Escalona et al., 1999. Plant Cell Reports. Ventajas del cultivo en inmersión temporal  Evita la inmersión continua de los explantes en el medio líquido.  Garantiza el intercambio gaseoso.  Limita los cortes.  Facilita cambios secuenciales del medio.  Permite la semi-automatización del proceso.  Reduce la contaminación.  Bajos costos. BIT® : Primera Generación para la producción masiva de plantas. Producción masiva de piña y caña de azúcar. Centro de Bioplantas BIT®: Segunda Generación Propagación masiva de caña de azúcar BIT®: Tercera Generación Controlador  Inyección de CO2 mejora cultivo fotomixotrófico.  Utilización de ventilación forzada.  Mayor calidad de plantas.

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